Comparación de tres tecnologías en la preservación de conidias de hongos filamentosos y pruebas de viabilidad.
Resumen
Conservar una colección de hongos es una tarea que demanda constante dedicación y vigilancia. Requiere conocer sus características morfológicas, fisiológicas y bioquímicas, así como sus requerimientos en cuanto a los métodos de preservación. El objetivo del presente trabajo consistió en evaluar la viabilidad, pureza y estabilidad morfológica de siete cepas de hongos filamentosos, previamente identificados. Las cepas identificadas como Aspergillus niger, Aspergillus awamori, Aspergillus oryzae, Aspergillus flavus, Penicillium chrysogenum, Penicillium sp., y Trichoderma harzianum, fueron subcultivadas y preservadas en placas con medio agar dextrosa papa (ADP) durante 18 meses. La preservación se realizó tratando las conidias obtenidas de los cultivos. Las conidias fueron sujetas a tres diferentes métodos de preservación: a) liofilización, b) en suelo-Arena y c) en papel filtro. Un mantenimiento a largo plazo es esencial para estudios detallados de las especies. La viabilidad y pureza de las especies fungales se monitorearon después de un almacenamiento a 10ºC de 2 meses a dos años. En la preparación de la suspensión de conidias para liofilización se utilizaron Tritón X-100 como estabilizante y leche descremada como solución crioprotectora. El método de liofilización fue favorable pero destructible comparado con el método de secado en papel filtro dando como resultado daños severos al material fungal lo cual se reflejó en tiempos prolongados de germinación. El método de preservación en suelo-arena mostró las menores viabilidades de los métodos. Se concluye que el método de liofilización es un método simple y confiable para la preservación a largo plazo el cual presenta menos riesgos de contaminación.
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Citas
Borman, A., Szekely, A., Campbell, C. & Johnson, E. (2006). Evaluation of viability of pathogenic filamentous fungi after prolonged storage in sterile water and review of recent published studies on storage methods. Mycopathologia, 161 (6), 361-68.
DOI: 10.1007/s11046-006-0023-z
Braun, S. & Vecht-Lifshitz, S. (1991). Mycelial morphology and metabolite production. Trends in Biotechnology, 9 (1), 63-68. DOI:10.1016/0167-7799(91)90020-I
Ciurzynska, A. & Lenart, A. (2011), Freeze-Drying - Application in Food Processing and Biotechnology - A Review. Polish Journal of Food and Nutrition Sciences, 61 (3), 165-71. DOI: 10.2478/v10222-011-0017-5
Fong, Y.K., Anuar, S., Lim, H.P., Tham, F.Y. & Sanderson, F.R. (2000). A modified filter paper technique for long-term preservation of some fungal cultures, Mycologist, 14 (3), 127-130. DOI:10.1016/S0269-915X(00)80090-7
Gallo, M. B., Guimaraes, D. O., Momesso, L. D. & Pupo, M. T. (2008 ). Natural products from endophytic fungi. Microbial Biotechnology. New India Publishing Agency, New Delhi, 139-168.
Kirsop, B. & Doyle, A. (Eds.). (1991). Maintenance of microorganisms and cultured cells - a manual of laboratory methods, p. 17-18. London: Academic Press.
http://tocs.ulb.tu-darmstadt.de/18929079.pdf
Lalaymia, I., Cranenbrouck, S. & Declerck, S. (2014), Maintenance and preservation of ectomycorrhizal and arbuscular mycorrhizal fungi, Review, Mycorrhiza, 24 (5), 323-337. DOI: 10.1007/s00572-013-0541-8.
Leck, A. (1999). Preparation of lactophenol cotton blue slide mounts. Community Eye Health, 12 (30), 24. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1706009/
Loustau-Gómez de Membrillera, J. (1950). Clave determinativa de las especies del género Penicillium.
Loustau-Gómez de Membrillera, J. (1951). Clave determinativa de las especies del género Aspergillus.
Oliveira, I., Pereira, J.A., Bento, A. & Baptista, P. (2011). Viability of Beauveria bassiana isolates after storage under several preservation methods. Annals of Microbiology, 61(2), 339-344. DOI: 10.1007/s13213-010-0147-8
Rifai, M. A. (1969). A revision of the genus Trichoderma. Mycological Papers, 116, p.1-56. http://www.mycobank.org/BioloMICS.aspx?Link=T&TableKey=14682616000000061&Rec=2936&Fields=All
Ryan, M. J. & Smith, D. (2007). Cryopreservation and Freeze-Drying of fungi employing centrifugal and shelf Freeze-Drying. In Cryopreservation and Freeze-Drying Protocols, p. 127-40. Humana Press. DOI: 10.1007/978-1-59745-362-2_9
Toegel, S., Salar-Behzadi, S., Horaczek-Clausen A. Viernstein, H. (2010). Preservation of aerial conidia and biomasses from entomopathogeni fungi Beauveria brongniartii and Metarhizium anisopliae during lyophilization. Journal of Invertebrate Pathology, 105 (1), 16-23. DOI: 10.1016/j.jip.2010.05.004
Windels, C.E., Burnes, P. M., & Kommendahl, T. (1988). Five-year preservation of Fusarium species on silica gel and soil. Phytopathology, 78 (1), 107-109. https://www.apsnet.org/publications/phytopathology/backissues/Documents/1988Articles/Phyto78n01_107.pdf
- COMPARACIÓN DE TRES TECNOLOGIAS EN LA PRESERVACIÓN DE CONIDIAS DE HONGOS FILAMENTOSOS Y PRUEBAS DE VIABILIDAD
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